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    蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑒定

     
    品牌: 百泰派克生物科技
    商會會員價: 面議
    發貨期限: 自買家付款之日起 3 天內發貨
    所在地: 北京
    有效期至: 長期有效
    最后更新: 2020-09-02 17:08
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    公司基本資料信息
    詳細說明
     百泰派克生物結合MALDI-TOF質譜系統與LC-MS/MS質譜系統,提供專業準確的蛋白膠點、膠條、IP樣品質鑒定服務。可鑒定的樣品包括:1D-SDS PAGE分離的蛋白膠條,2DE PAGE中的蛋白膠點,蛋白表達產物,免疫共沉淀(Co-IP)樣品。其中,蛋白質樣品的鑒定前處理過程嚴格按照Nature Methods發表的文章:Universal sample preparation method for proteome analysis進行,保證鑒定試驗中得到更高的肽段覆蓋率。質譜鑒定的原理則是基于鳥槍法(Shot-gun):將蛋白條帶或者蛋白溶液酶切成肽段混合物,經高效液相色譜分離得到若干較為簡單的組分,進入高分辨率質譜儀中進行分析。檢索軟件根據二級質譜信息與相應的數據庫比對,結合匹配度打分及錯配過濾,可得到肽段的確切序列,進而拼接出各蛋白的完整序列,從而實現對蛋白的鑒定。

    蛋白質質譜鑒定流程

    鳥槍法(shot-gun)LC-MS的蛋白鑒定流程

    基于鳥槍法(shot-gun)LC-MS的蛋白鑒定流程

    關于樣品

    1D SDS PAGE /2D PAGE gels樣品:
    1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby 以及Silver stain樣品均可進行蛋白的鑒定試驗;
    2. 銀染的樣品有可能與后續的質譜分析不兼容,我們推薦您使用下面的產品或者實驗步驟進行銀染實驗:
    ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2)
    Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)
    3. 銀染的樣品請不要進行脫色處理

    液體樣品(In solution format):
    1. 假如樣品中蛋白量>10ug,我們對樣品的緩沖體系沒有要求;
    2. 假如樣品中蛋白量<10ug,樣品準備過程中盡量減少SDS等表面活性劑的使用,并注意降低鹽濃度;
    3. 提交樣品過程中,注意提供樣品的緩沖體系和樣品中蛋白的預估含量;

    Co-IP樣品:
    1. 如果您洗脫的樣品需要跑膠,請按照1D SDS PAGE樣品準備要求準備樣品即可;
    2. 如果您直接提交洗脫樣品,我們推薦使用HPH EB (0.5 M NH4OH, 0.5 mM EDTA) 緩沖體系進行蛋白洗脫,保證洗脫緩沖體系與后續的質譜實驗兼容;

    樣品運輸:
    1. 我們推薦您將樣品凍干后進行運輸,凍干樣品中蛋白非常穩定。
    2. 液體樣品推薦干冰運輸,短途運輸冰袋也可以。

    注意事項: 利用質譜進行蛋白樣品的鑒定,在樣品準備過程中需佩戴手套和頭套,盡量避免自身角蛋白(keratin)對樣品的污染。

    研究案例

    該項目是中國科學院生物物理所一位老師將她的Co-IP的樣品寄給我們進行蛋白鑒定。得到的部分結果如下圖所示:

    蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白鑒定研究案例

    蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白鑒定研究案例

    從圖中客戶看出,我們提供的結果報告中包含鑒定到的蛋白的Accession Number, Peptide coverage, 鑒定出的肽段信息,鑒定出的肽段的修飾信息以及對鑒定到的蛋白的詳細描述。

    中/英文項目報告:

    在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:

    1. 實驗步驟(中英文)
    2. 相關的質譜參數(中英文)
    3. 質譜圖片
    4. 原始數據
    5. 鑒定的蛋白質詳細信息

    蛋白膠點、膠條、IP樣品質譜鑒定一站式服務

    您只需下單-寄送樣品
    百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告

    How to order?
    更多>本企業其它產品
    蛋白質相互作用分析 蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑒定 基于SDS-PAGE的蛋白分離 蛋白分子量測定 蛋白質質譜鑒定
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